新技術は、コロニー崩壊症候群で矛盾する主張を調整することが病原体を検出
ジェームスフィッシャー
ジェームズフィッシャー（ james.fischer @ gmail.com ）用
" アメリカのビージャーナル "（ http://www.american beejournal.com ）
（2010年10月6日17:00 EDTまでジャーナル PLoS ONEで輸出禁止国）
研究者の多施設チームは、ミツバチの新たな侵襲的な、エキゾチックな病原体の増え続ける動物園を通してふるい、そして一貫して2006年から2009年に採取したサンプルのコロニー崩壊症候群（CCD）に苦しんで蜂の巣に同じ2つの疾患の生物を発見した。
彼らは北米で前に見たことのない新しいウイルスを発見し、腸の蜂の病気のNosemaのよく知られている侵襲的な変種を発見した。 先行研究が相互に矛盾する調査結果を発表した理由を見落としてウイルスを説明することがあります。 この新しい証拠は、彼らの結論で共通の基盤を欠いている日付に、研究チーム間の合意の基礎を作成することができます。
彼らの論文はジャーナル PLoS ONE（にほんの数分前に登場http://dx.plos.org / 10.1371/journal.pone.0013181 ）
ホワイトペーパーでは、コロニー崩壊症候群の複数年の研究報告。 研究者は、蜂の巣箱ではなく、他の方法で検出できる可能性病原体の小さなサブセットを折り畳んですべての病原体を検出し、明確に識別するための新しい技術および手法を使用していました。
無脊椎動物玉虫色ウイルスは、（"IIV"）、新たに見つかった海外の少ない最近から到着したNosema ceranae、、との組み合わせで、北米での"ほぼすべてのCCDコロニーから蜂の"からサ ンプリングが広く分散して米国のじんましんで発見された2009年まで2006。
IIVがオーストラリアからも、モンタナ州で分離された非遊走商業ハチの操作から蜂のインポートされたパッケージから蜂で発見されていない、両方のサイトでは、CCDのような症状の自由を確認した。
さらに、研究者は、"崩壊コロニーにCCDの進行を観察...蜂のサンプルを取って... 3ヶ月の期間にわたって、唯一の女王と4人の労働者が残ったときに終わる。"
他の蜂がIIVのウイルスの"IIV - 6"株を接種している間、さらにはまだ、いくつかの蜂は、Nosema ceranaeを接種した。 その死亡率は、両方の病原体を接種した蜂、およびプラセボ与えられた対照群と比較した。 結果は、"強くN. ceranaeとIIVの組み合わせが増加ミツバチの死亡率に関連付けられていることを示唆している。"
まださらに、努力は前の北米で検出されたことがない二つの追加侵襲的なエキゾチックな蜂のウイルスを発見したが、それらはCCDに関与していないと判断した。 見つかったウイルスは、"Varroaデストラクタ- 1ウイルス"と"Kakugoウイルス"、アジアの両方にネイティブです。
Uモンタナの博士ジェリーBromenshenkは、次の手順を概説した、"私達は米国のミツバチで発生する特定の虹色のウイルスにミツバチを接種し、分離、特性評価、および、保留中の提案を持っている。 ウイルスは、世界の知られている虹色のウイルスのいずれかのように表示されないので、これは重要なステップです。 かつて我々は実際のウイルスを持って、我々は本当にCCDの原因を見つけたかどうかをテストするために必要な接種試験を完了することができます。"
プロテオミクス-簡単なまとめ
本研究で使用した技術は、貿易のグローバル化によって海洋上で伝送病原体の増え続けるリストに対処するための理想的なようである。 これは、任意の既知の病原体と同一である必要はない病気の病原体を検出することができます。 これは、1980年代初頭から米国でミツバチを悩ませてきた侵入種の数を考えると、明らかに養蜂家のニーズを説明します。
"質量分析ベースのプロテオミクス"（MSP）は、約60ミツバチがブレンダーで投げから始まり、そして均質、次いで濾過まで混合。 ペプチドにそれらを分解し、細胞は化学的にバーストされ、そしてタンパク質は絶縁されてミックスからして"消化"。 得られたペプチドは、それらの構造や配列がデバイスの、"タンデム型質量分析計"別のセットによって決定されることができる密度、でそれらを分離するために"液体クロマトグラフ"と呼ばれるデバイスを介して実行されます。
それぞれのペプチド配列は、バイオテクノロジーのためのNIHナショナルセンター（NCBI）ペプチド配列のデータベースと比較されます。 使用されるデータベースは、特定の生物に固有のペプチドのコレクションです。 これは、ペプチド配列の各試合は、単一の生物に固有の一致であることを意味します。 複数の生物で使用される任意のペプチドは、データベース内ではないでしょう。
米軍のエッジウッド化学生物学センターのDr。チャールズウィックは、ウイルスがCCDの症状を示すコロニーで検出されたと確実性のレベルを説明した："IIVは18900ユニークなペプチドを持っている...我々は、これらのいくつかを検出すると、我々は、50〜100と言う明確に識別するための十分な証拠を持っている。"
しかし、どのように彼らは博士ウィックは、"世界で知られている虹色のウイルスのいずれか"ではないに博士Bromenshenkで言われていたウイルスの"明確な識別"と呼ばれるものを作るのですか？どのように誰も前に検出されていないか、または特定されたことだものを見つけることができる？ 答えは、未知の生物がいない場合は、"種"、少なくとも"家族"や"属"のレベルに物事を狭くデータベース内の最も近い生物を、一致することです。 ので、さらに興味のIIVの特定の菌株を配列決定することなく、十分なペプチドは、どのような発見されたことがIIVの菌株であることを確認するためにデータベースにIIV株と一致した。
この技術によって投げられる広い網の例として、NosemaはNCBIのデータベースではよく表現さではなかったので、単独でプロテオミクス経由Nosemaの同定に、多少のあいまいさは、唯一の属Nosemaに一致する、そこにあった。 種とひずみは、ポリメラーゼ連鎖反応（PCR）技術を使用してNosema ceranaeとして確認された。
スペインではクレームは、主に説明することができる
ビー病理学研究室、MarchamaloのセントロApícola地域のマリアーノのHigesが率いる研究では、スペインでは、繰り返し迅速なコロニーの崩壊の唯一の近因としてNosema ceranae性を指摘している。 Nosemaはスペインの病原性外としてのように見えていないので、これは、米国および他の場所で研究者にそう思えた。 しかし、この新しい仕事は、新しく検出されたIIVの追加以上のものでHigesの仕事をサポートできる説明を提供しています。
以前の米国の研究と同様に、スペインの誰も蜂のウイルスの大半はRNAウイルスであるため、IIVのようなDNAウイルスが関与することを疑う理由はなかっただろう。 そこで、彼らはスペインでIIVを探すために、まだだ、と彼らは求められていませんでしたものを見つけるためにMSPの広いネットを持っていなかった。 良いニュースは、博士Higesが凍結歴史的なサンプルを持っているということです。 博士ジェリーBromenshenkのHigesチームがMSPを使用してスペイン語のサンプルをスクリーニングするために共同で従事する意志があることを報告。
これは米国ではCCDを説明していますか？
本研究で分析したサンプルはNosemaを含む病原体の広い範囲を、示し、玉虫色ウイルス（"IIV"）、ブラッククイーン細胞ウイルス、急性蜂麻痺ウイルス、イスラエル急性麻痺ウイルス、変形翼ウイルス、サックのひなウイルス、カシミールビー無脊椎動物ウイルス、Varroaデストラクタ- 1ウイルス、およびKakugoウイルス。 他の研究努力によって指定された疑いのある病原体のいずれも、2つの新しい小説病原体が発見された、逃していない、とMSPの使用には、病原体が見落とされなかったことを意味した。 であっても新しい、未知の、そして無名の病原体は、いくつかの他の生き物への部分ペプチドの試合になる可能性のある。
そう、病原体のカウントやミックスはサンプル数が不十分で偏って、または操作の数が不足からサンプルを収集しているかもしれませんが、それは追加の病原体が存在するが、まだCCDに関与できることを発見されることを想像することは困難である。
バイオセキュリティについて不安
1980年代以降、"グローバリゼーション"は、ますますアジアの港から西の海岸への商品の出荷で構成されていました。 この研究は、一貫して1980年代初頭における米国の養蜂家に未知のアジアへのネイティブ特有の蜂の病原体を、見つけることによって、ドットを接続しますが、それ以来、あまりにも慣れてきた。
"我々はアジアのミツバチで、アピスceranae、寄生虫や病原体共存の組み合わせは、を含むことを知っている：（1）Nosema ceranae、（2）虹色のウイルス、（3）寄生と捕食性ダニ、および（4）二つのRNA型ウイルス、カシミール蜂ウイルスとSacbroodウイルス。 私たちは、北米が10年以上にさかのぼってのカシミール蜂ウイルスとNosema ceranae両方があった。 私たちは、虹色のウイルスのCCDの株はアピスceranaeからIIV - 24菌株がいかに似て見る必要があります。 米国のミツバチがNosema ceranaeとカシミールミツバチのウイルスと一緒にアピスceranaeからIIVを取得した可能性があります。"
CCDのための根拠のない"フリンジ"の説明は、携帯電話からのGMO作物への農薬に至るまで、たくさんある一方で、一般的な要因は、以前はアジアで見られる病原体は、米国などの効果的なバイオセキュリティを欠いている国、に、ではなく、より多くの国に広がっていることです。ニュージーランドなどバイオセキュリティに堅牢なアプローチ、。 "彼らは植民地に追加される前に、そのようなインポートミツバチのテストなどの標準検疫プラクティス、および機器の消毒は可能性が役立つだろう。"研究チームは示唆している
養蜂家のための実践的含意
チームは、養蜂家への関心の2つの提案を持っています。
- "ほとんどのIIVsは約21 C（70 F）で複製され、30〜32℃（86〜89 F）の上に複製されません。 涼しい気候と湿気の条件がIIVとNosema両方のレプリケーションをスピードアップすることができるのに対し、より高い温度では、レプリケーションを停止して、ウイルスを抑制することがあります。 CCDの多くのインスタンスが涼しい、湿った天候の長時間続く 発生している。 いくつかの養蜂家は、彼らが頻繁に霧がある地域や天候がクーラーである丘陵地帯の蜂とのより多くの問題があることを私たちに報告している。 暖かく、日当たりの良い場所で蜂を配置することを助けるように見えます。"
- "Varroaは蜂のコロニーの間でIIVの分散のためのベクターとして作用し得る。 Varroaは、他のウイルスによる被害を増大させることが知られ、そしてvarroaレベルを制御するために失敗した養蜂家は、高いコロニーの損失を被る可能性が高いです。"
これは多くのように聞こえるかもしれないが、それは我々が"強いコロニーを維持する"と"ストレスを最小限に抑えること"について引き渡さとオーバーしてきたいつもの曖昧な決まり文句以上の広大な改善です。 それもアップ日陰でじんましんを置くとSunのハイブを置く以上の養蜂家の間で古くからの論争のアンティ。
"ミツバチのコロニーの減少にリンクされたイリドウイルスと微胞子"
ジェリーJ. Bromenshenk、コリンB.ヘンダーソン、チャールズH.ウィック、マイケルF.スタンフォード、アランW. Zulich、ラビアムルエE. Jabbour、サミールV.デシュパンデ、パトリックE. McCubbin、ロバートA. Seccomb、フィリップM.ウェルチ、トレバーウィリアムス、デビッドR.ファース、エヴァンSkowronski、マーガレットM.レーマン、シャンL. Bilimoria、ジョアンナグレス、ケビンW.ワナー、ロバートA.クラマージュニア
（2010） ワンPLoS 5（10）：e13181。 土井：10.1371/journal.pone.0013181
ジムフィッシャーはマンハッタン、ブルックリン、ブロンクスの蜂を保持し、クイーンズの女王を高めることを望んでいます。 彼は846 -メンバー非営利NYCの養蜂グループのニューヨークのセントラルパークでフリー16週間のフルセメスター都市養蜂のクラスを教えて（ http://meetup.com/nyc-beekeeping ）とゴッサムシティハニーCoを実行することができます- OP（ http://GothamCityBees.com ）。
